Кафедра биофизики

  • Increase font size
  • Default font size
  • Decrease font size
Главная страница Практикумы Отделение медицинской биофизики Современные биофизические технологии. Материалы для подготовки.

Современные биофизические технологии. Материалы для подготовки.

Email Печать PDF
Практикум по курсу "Современные биофизические технологии". 

Цикл "Флуоресцентная спектроскопия".
Список вопросов для подготовки.

 1) Люминесценция. Виды люминесценции в зависимости от способа возбуждения. Фотолюминесценция.
 2) Типы энергетических переходов в молекулах после поглощении света оптического диапазона спектра. Колебательная релаксация. Внутренняя и интеркомбинационная конверсия. Флуоресценция и фосфоресценция.
 3) Правило Каши. Исключение из правила Каши.
 4) Закон Стокса-Ломмеля. Стоксов сдвиг. "Стоксовая" и "антистоксовая" области спектров. Влияние растворителей на спектры люминесценции.
 5) Правило Левшина. Исключения из правила Левшина.
 6) Закон Вавилова. Энергетический и квантовый выход люминесценции, связь между ними.
 7) Техника флуоресцентной спектроскопии. Флуориметры и спектрофлуориметры.
 8) Спектры флуоресценции. Спектры возбуждения и испускания флуоресценции. Синхронные спектры флуоресценции.
 9) Выражение для интенсивности флуоресценции. Выражение для интенсивности флуоресценции при регистрации спектров возбуждения и спектров испускания.
10) Коррекция спектров возбуждения и испускания флуоресценции.
11) Качественный флуориметрический анализ. Качественный анализ по спектрам испускания флуоресценции.
12) Взаимосвязь между спектром поглощения и спектром возбуждения флуоресценции. Применение спектров возбуждения флуоресценции в качественном анализе.
13) Количественный флуориметрический анализ. Связь между интенсивностью флуоресценции и концентрацией вещества.
14) Методы количественного определения веществ во флуориметрическом анализе. Метод градуировочного графика, метод сравнения со стандартом, метод добавок, метод внутреннего стандарта. Области применения, преимущества и недостатки методов.
15) Чувствительность флуориметрических методов анализа. Коэффициент чувствительности, предел обнаружения, нижняя граница определяемых концентраций, диапазон измеряемых концентраций.
16) Зависимость люминесцентных характеристик от внешних факторов. Влияние температуры, рН, полярности растворителя, концентрации, светорассеяния образца.
17) Эффекты внутреннего фильтра. Эффекты экранировки и реабсорбции.
18) Время жизни возбуждённого состояния. Излучательное (собственное) и реальное время жизни. Связь с квантовым выходом люминесценции.
19) Тушение люминесценции. Статическое и динамическое тушение. Уравнение Штерна-Фольмера.
20) Флуоресцентные зонды. Определение, классификация, применение в биофизических исследованиях.
21) Связывание флуоресцентных зондов с биологическими объектами. Некооперативное и кооперативное связывание. Уравнение для константы некооперативного (простого) связывания, физический смысл этой константы.
22) Параметры связывания флуоресцентных зондов с биологическими объектами. Метод двойных обратных координат, метод Клотца, метод Скэтчарда.

Литература.
Владимиров Ю.А., Рощупкин Д.И., Потапенко А.Я., Деев А.И. "Биофизика".

Презентации лекций.
Деев А.И. "Связывание лигандов с макромолекулами".

Методички (Обновлено!).
Теселкин Ю.О. Метод флуоресцентных зондов. Определение параметров связывания флуоресцентного зонда АНС с белками.